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        用于 ELISA 檢測的樣品處理

        更新時間:2025-05-19  |  點擊率:643


          用于 ELISA 檢測的樣品處理


          在醫學檢測中,如何正確處理樣品直接影響檢測結果的準確性,尤其是 ELISA 檢測中不同樣品的處理方式各異,如何選擇?

          在醫學研究中,酶聯免疫吸附試驗被廣泛用于檢測各種生物標志物。然而,不同的樣品類型需要不同的處理方法,以確保檢測結果的準確性。例如,采集的血液樣本需在室溫或低溫下靜置,隨后通過離心分離成血清或血漿。其中,血清是從血液中分離出來的無細胞成分,而血漿則含有纖維蛋白原和其他凝血因子。選擇正確的抗凝劑也很關鍵。此外,對于組織勻漿和細胞裂解物,需注意添加蛋白酶抑制劑以防止目標分析物降解。正確處理細胞培養上清液,則需要通過離心去除雜質。每一步操作都至關重要,直接關系到最終的檢測結果。因此,研究人員和醫療工作者在進行 ELISA 實驗前,天正信達詳細介紹并嚴格遵循相應的樣品處理指南,以確保實驗的成功和數據的可靠性。

          以下是用于ELISA檢測的樣品處理規范及注意事項:

          一、樣本類型及預處理方法

          血清樣本?:

          采集后室溫靜置30分鐘至2小時(或4℃過夜)使血液凝固

          離心條件:2000-3000×g離心15-20分鐘

          關鍵點:避免溶血,傾斜試管擴大血清分離面


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          血漿樣本?:

          需使用EDTA/肝素抗凝管采集

          采集后30分鐘內離心(700-1000×g,10-15分鐘)

          注意:不可吸取中間白細胞層

          細胞培養上清?:

          直接離心(1000×g,20分鐘)去除細胞碎片

          分泌性成分檢測需確保無菌收集

          組織樣本?:

          需用預冷PBS沖洗殘留血液(1:9重量體積比勻漿)

          推薦加入蛋白酶抑制劑,超聲或凍融輔助裂解

          二、保存條件規范

          樣本類型 短期保存 長期保存 有效期

          血清/血漿 4℃(1周內) -80℃分裝 1-6個月

          細胞上清 4℃(24小時) -80℃分裝 1個月

          組織勻漿 4℃(立即檢測) -80℃分裝 3個月

          三、關鍵注意事項

          干擾物控制?:

          嚴禁使用含NaN3的防腐劑(會抑制HRP活性)

          脂血/溶血樣本需額外離心處理

          凍融要求?:

          分裝保存避免反復凍融(≤3次)

          復溶時需室溫平衡后輕柔混勻

          濃度調整?:

          預實驗確定稀釋倍數(建議2-500倍梯度)

          OD值超標準曲線時應稀釋重測

          四、特殊樣本處理

          尿液/胸腹水?:需10000×g高速離心去除顆粒物

          紅細胞裂解物?:用4倍體積超純水裂解后離心

          食品樣本?:需均質化處理并去除脂肪層

          注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或供應商。

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