人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書 以下是關于人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理： BS-0186 人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒 一、實驗原理 采用雙抗體夾心法(或雙抗原夾心法)檢測樣本中KGF濃度。通過包被抗體/抗原與待測物結合，再與酶標抗體形成復合物，經TMB顯色后測定OD值，濃度與顏色深淺成正比。 二、試劑盒組成 主要組分? 預包被微孔板(96孔或48孔) 標準品(凍干粉，通常含2-8管，濃度0-400 pg/mL不等) 酶標抗體、生物素化抗體、HRP標記親和素(不同品牌配置差異) TMB底物液、終止液(2N H?SO?) 濃縮洗滌液(需20-30倍稀釋) 自備物品? 酶標儀(450nm)、移液器及槍頭 37℃恒溫箱、蒸餾水 三、樣本處理 樣本類型 處理方法 血清? 室溫凝固10-20分鐘后，2000-3000rpm離心20分鐘，避免溶血 血漿? EDTA/肝素抗凝，離心后取上清 細胞上清? 1000-3000rpm離心10-20分鐘去除顆粒 組織勻漿? PBS勻漿后離心取上清，分裝保存于-20℃ 注意?：避免反復凍融;NaN?會抑制HRP活性，需排除此類樣本。 四、操作步驟 試劑準備? 標準品復溶：加入指定體積稀釋液(如0.5-1mL)，靜置10分鐘混勻。 洗滌液稀釋：按1:19~1:20比例用蒸餾水配制。 檢測流程? 加樣：標準品/樣本每孔50-100μL。 孵育：37℃溫育60-120分鐘。 洗板：手工或洗板機洗滌4-6次，拍干。 加酶標抗體：每孔100μL，37℃孵育60分鐘。 顯色：加入TMB底物，避光反應15分鐘。 終止：加入終止液后15分鐘內測定450nm OD值。 五、注意事項 保存條件?：未開封試劑盒2-8℃保存;溶解后標準品建議分裝凍存。 精密度?：批內CV<10%，批間CV<12%。 干擾因素?：溶血、細菌污染、反復凍融可能導致假陽性或濃度偏差。 注：以上資料僅供參考，如需具體品牌說明可進一步提供貨號查詢詳細參數。 | 
