大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒實驗原理 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒的實驗原理主要基于?雙抗體夾心法?，通過特異性抗體捕獲目標蛋白并顯色定量。以下是詳細解析： 一、核心檢測原理 抗體包被? 試劑盒預包被抗Ki-67蛋白的單克隆抗體于酶標板微孔中，形成固相捕獲層?。 抗原-抗體結(jié)合? 樣本或標準品中的Ki-67蛋白與包被抗體特異性結(jié)合，形成“抗體-抗原"復合物?。 信號放大? 加入生物素標記的二抗(抗Ki-67多克隆抗體)，與已結(jié)合的抗原形成“抗體-抗原-二抗"復合物?。 通過鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶(SA-ABC)系統(tǒng)進一步放大信號?。 顯色與定量? 加入TMB顯色底物后，酶催化反應生成藍色產(chǎn)物，終止液變黃，在450nm波長下檢測吸光度(OD值)，Ki-67濃度與OD值呈正比?。 二、關(guān)鍵組分與流程 試劑盒組分?：包被抗體、生物素化二抗、SA-ABC復合物、TMB底物、終止液等?。 操作步驟?： 樣本稀釋與加樣 37℃孵育(通常1小時) 洗滌去除未結(jié)合物質(zhì) 加入二抗與SA-ABC復合物 顯色反應后終止并讀數(shù) 三、技術(shù)特點 高特異性?：雙抗體夾心法可減少交叉反應，提高檢測準確性?。 靈敏度?：檢測范圍通常為0.312-20ng/mL，適用于低豐度蛋白檢測?。 標準化?：需通過標準曲線計算樣本濃度，確保結(jié)果可比性?。 四、注意事項 樣本處理?：避免反復凍融，建議使用新鮮組織或血清樣本?。 干擾因素?：高濃度內(nèi)源性生物素或異嗜性抗體可能影響結(jié)果，需通過稀釋或阻斷劑處理?。 如需進一步了解Ki-67的生物學功能或臨床意義，可參考免疫組化檢測的相關(guān)研究?。 注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應商。 天津天正信達供應：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。 | 
